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高效液相色譜廣泛應用于各種領域的樣品分析測定,其中C18反相色譜柱可以分析絕大多數的化合物,是一款常用且入門的色譜柱。柱子在使用中,日常的維護和活化該如何去做呢?恒譜生帶大家了解!
uHPLCs恒譜生建議在使用一款新的液相色譜柱前,最好進行柱性能試驗,記錄試驗條件和結果,作為今后評價柱性能變化的參考。柱效對于色譜柱是一個非常重要的考慮因素,想要分析結果好就一定要好好保養色譜柱,維護它的高柱效。測試時要注意:你的測試環境與條件應該按照色譜柱出廠報告中的條件進行,這樣測得的結果才有可比性。
分析樣品前要對色譜柱進行平衡,等到基線平穩后再進樣分析,一般花30分鐘用流動相平衡就可以了。 新液相色譜柱使用前根據自己柱子的特性選擇合適的試劑將柱子中保存試劑清洗出來,特別需要注意清洗用的溶劑與保存的溶劑相溶性。
日常使用完色譜柱后,一定要注意清洗!實驗分析時如果使用含鹽的流動相,結束后需要用含10%的甲醇的流動相沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中殘留的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。特別注意:不能用純水沖洗柱子,防止將填料沖塌陷。
新買的液相色譜柱需要活化,不同的柱子活化的方法也不同。舉例常用的c18色譜柱活化可以用0.5ml/min流速的甲醇沖洗2小時以上。柱子內有保存液,用甲醇沖洗掉柱中可能殘留的其他雜質,以免影響后續分析工作?;罨暮锰幱泻芏?,能排除有機相揮發所產生的起泡。C18柱是鍵合了c18的,用甲醇沖活化c18柱能使鍵合更好的排列,更有利于分析測定。柱子在活化時最好不要接檢測器,這樣可以避免不必要的化學污染。
hplc色譜柱是比較昂貴的色譜耗材,想要長久的使用下去,日常就需要注意保養。想要延長色譜柱使用壽命,可以選擇色譜保護柱,過濾掉系統內部和樣品殘留的污染物。大多數的反相色譜柱有自己的ph使用范圍,像恒譜生ods反相色譜柱ph范圍在2-8之間,盡量不要超過這個范圍去使用,避免對柱子造成損傷。