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高效液相色譜法中,對色譜圖分析是很重要的。你可以將色譜圖看成一個橫縱坐標為時間與數據的二維圖。固定相則是像海綿一樣的柱子,里面很多孔洞讓樣品流動,由于每個樣品物質的吸附能力不同,在色譜圖中會有不同的峰形。
保留時間是樣品通過高效液相色譜柱所需要的時間,你在使用相同的流動相和色譜柱分析同一樣品時,出現的保留時間應該是固定的。如果保留時間不同可能是里面有雜質造成影響。
在液相色譜分離過程中,容易出現色譜圖中未出峰、一個或者多個峰是負峰、寬峰、雙峰、拖尾峰等問題,我們稱之為鬼峰。鬼峰來源復雜且多樣,主要來源于流動相中殘留的污染物,緩沖鹽等等。恒譜生鬼峰捕集柱對弱極性和非極性的有機雜質有強烈吸附作用,可以有效消除污染物,避免鬼峰出現對實驗造成干擾,大幅度縮短實驗時間,從而提高工作效率,還能延長分析色譜柱和儀器壽命。
如果發生進樣量與峰面積不是線性關系的問題,那十之八九是樣品在流動相中的溶解度小,導致有一部分部分樣品被流動相沖入色譜柱中,沉積在柱入口端。
總之,實驗影響的因素是復雜且多樣的,做好一些預先準備工作能夠預防一些問題的發生。比如在液相柱前添加一個色譜保護柱,能夠過濾攔截樣品中的污染物或者系統內的金屬離子,能夠有效避免峰型異?;蛘咧Р患?,影響液相色譜柱的使用壽命。