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液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質,在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱,GPC柱,聚合物填料柱等。液相保護柱在使用中最常見的問題:就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正?,F象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統管路堵塞及壓力傳感器故障除外),可能的原因有如下幾點...
.氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱保存在正相環境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。正相使用新柱子可直接用流動相。推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積,再根據流動相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速沖10倍柱體積,最后換成流動相。正相使用時,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動相要*脫氣,并不得含有羰基化合物和過氧化物(質...
高效液相色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱使用時間后就會出現柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化,如不采取措施,將會縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經濟損失。因此,有必要加強和規范色譜柱的管理,從而延長色譜柱的使用壽命。本文從影響色譜柱使用壽命的幾個因素出發,從管理的角度,探討色譜柱的維護與保養。影響高效液相色譜柱使用壽命的因素1.流動相在以水溶液為...
反相色譜柱為色譜柱提供方便、經濟和有效的保護,延長了色譜柱的壽命,分析結果的重現性。隨著使用時間的增加,高效液相色譜柱分離效能下降,柱壓增高,其原因主要是由于色譜柱進口段的少量填料被污染引起的,而色譜柱整個柱床并未被破壞,使用保護柱,相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料,起到了保護整個色譜柱的作用。反相色譜柱特點:采用高度可控的單分子層形成和封尾技術;高的柱間重現性;高的選擇性和分離效率;適合分離酸性、中性和堿性化合物,以及許多藥物和多肽等。反相色譜柱在使用緩沖液的過程中還要...
HPLC色譜儀器可以是一組單獨的模塊或元件,但也可以設計為單個裝置。模塊概念在單個組件失效的情況下更加靈活;此外,系統各個零件不必來自同一制造商。如果您不喜歡自己進行小修,您會更喜歡緊湊型儀器。然而,這并不需要比模塊化套件更少的工作臺空間。一臺HPLC儀器至少具有溶劑罐、帶篩板的傳輸線、高壓泵、進樣裝置、色譜柱、檢測器組成部分。一、高效液相色譜儀HPLC儀器通常由九個基本組件組成:流動相/溶劑容器、溶劑輸送系統、樣品引入裝置、色譜柱、柱后裝置、檢測器、數據收集和輸出系統、檢測...
雖然質譜聯用液相色譜已被證明是發現組學(蛋白質組學、脂質組學、代謝組學、食物組學和糖組學)領域的強大工具。組學研究經常受到樣本復雜性的挑戰。在處理少量樣品、小體積和復雜的樣品基質(生物流體和單細胞分析)時,對感興趣的分子進行識別和量化可能特別困難。液相色譜柱小型化可以克服這些挑戰。減小色譜柱內徑(ID)會降低色譜稀釋度并提高靈敏度,從而實現更高效的MS/MS采樣,從而實現更多的分子鑒定。當樣品量被注入色譜柱并被周圍的溶劑稀釋時,就會發生這種稀釋。在這種情況下,更少的溶劑意味著...