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液相色譜系統是一個封閉的系統,從最開始的溶劑瓶一直到最后的廢液瓶,期間是保持*封閉的,流動相在系統內應該是流動不會發生漏液或者外部氣體進入系統內部發生漏氣的現象。但是這是理想的液相系統,現實操作中還是會發生一些小問題、小故障從而產生漏液或者漏氣的現象。漏液的原因主要有以下幾種情況:(1)接頭處漏液一般是色譜柱接頭處漏液,可能是由于接頭損壞、松動、接口不匹配等情況而造成漏液。這時只要檢查接頭是什么問題,就差不多了。接口損壞可以替換新的,松動就擰緊,如果是不匹配的問題,最好是用色...
提起生物堿,制藥的小伙伴肯定不陌生,它是中草藥中最重要也*有價值的生物活性成分之一。生物堿可分為59種,它們的結構比較復雜,用傳統的方法分離效果不佳。高效液相色譜法還沒出現之前,對于生物堿的分離純化一直是學者們的難題。但是,即使使用液相色譜法分離,也會存在許多問題。堿性化合物分析中顯著的難題是峰形拖尾,而且堿性越強的時候,就越容易發生拖尾現象。恒譜生和你一起探討一下峰拖尾該如何避免!1、流動相調節流動相也可以改善峰拖尾的現象,前期在選擇流動相的時候,要考慮流動相pH值的范圍。...
液相色譜柱是液相色譜分析的核心,對于填料一直是色譜界研究的熱門項目。液相色譜柱的研究可謂是中原逐鹿,競爭十分激烈。液相色譜柱的發展都歷經了哪些變化呢?首先是柱子的柱體。從材質上,一開始采用玻璃制作,但是我們都知道玻璃這種東西十分不耐壓,液相色譜分析的運行壓力越來越高,甚至現在還有超高壓液相色譜,用玻璃的柱體是十分不合適的?,F在的液相色譜柱的柱管幾乎都是用金屬制作了。通常采用不銹鋼材質,具有高強度、高硬度的同時,不易生銹腐蝕、適用的溫度廣泛。恒譜生的液相色譜柱柱管就是采用不銹鋼...
誤區1:HPLC柱不可以反沖這是不正確的。通常情況下液相色譜柱所設計的耐壓值是遠高于最大操作壓力的。換柱時反沖可以清洗柱頭一些具有強吸附性質的物質,我們沖洗出這些殘留物質也是為了防止壓力增大。但是如果你購買的色譜柱在柱頭使用了大粒度的填料,這時你反沖會沖出這一部分填料。因此你要先檢查一下自己使用的液相色譜柱再選擇是否反沖。誤區2:所有的C18(L1)色譜柱都是一樣的這是不正確的。在早期的HPLC體系中,C18是僅有的反向色譜的鍵合固定相,因此C18就作為了反向色譜柱的標準。但...
色譜填料技術又稱層析分離技術或色層分離技術,是一種分離復雜混合物中各個組分的有效方法。它是利用不同物質在由固定相和流動相構成的體系中具有不同的分配系數,當兩相作相對運動時,這些物質隨流動相一起運動,并在兩相間進行反復多次的分配,從而使各物質達到分離。如今,色譜技術廣泛應用于工業中尤其是食品藥品行業,高效液相色譜也逐漸成為了食品藥品實驗室檢測部門的標配。在制藥行業,色譜層析制備柱也成了抗體、糖蛋白、抗生素等產品主要的生產設備。色譜填料的選擇要點有哪些呢?一、硅膠基質填料硅膠是H...
經常做蛋白質純化分離實驗的色譜工作者,對于疏水色譜(Hydrophobicinteractionchromatography,簡寫HIC)肯定不陌生,血清蛋白、膜結合蛋白、核蛋白、受體、重組蛋白等化合物純化都需要用HIC色譜法。HIC在是利用樣品分子與固定相的疏水力作用的不同,用流動相洗脫時,各組分遷移速度不同而達到分離的目的。疏水相互作用色譜法具有對蛋白質的回收率高,蛋白質不失活,蛋白質變性可能性小等優點。疏水作用色譜固定相的非極性比較弱,流動相多采用高濃度鹽緩沖液進行梯度...