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恒譜生建議各位色譜操作者在進行液相色譜分析前,關注樣品過濾的重要性,這是為什么呢?主要是為防止蛋白質等雜質沉積在色譜柱上,上柱前需對生物樣品進行去蛋白的預處理。這樣可以延長色譜柱壽命并減少維護成本,從而有助于提高實驗室通量。脫蛋白對于分析生物液體(例如血漿,血清,尿液和腦脊髓液)中的抗生素,殘留農藥含量等也起著非常重要的影響。并且如果不將沉淀的蛋白質從樣品中去除,會導致色譜柱性能下降,最終影響色譜分析結果的準確性。生物樣品中去除蛋白質的處理方法有3種:利用蛋白質脫水沉淀。采用...
色譜柱填料技術呈現二大趨勢。一個趨勢是快速液相,利用亞2?m小粒徑硅膠、核殼型硅膠;第二大趨勢是越來越豐富的選擇性。填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數,即柱效和背壓。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3μm的填料應用,在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是位一的因素。如果固定相選擇是真確,但是分離度不夠,那么選擇更小粒度的填料是很用有的,3μm填料填充柱的柱數比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而,3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時,柱效提高意味...
色譜工作者都知道,在液相色譜儀或者高效液相色譜儀工作時,不能有氣泡進入系統,否則會出現諸如雜峰、壓力波動不穩定和基線噪音等問題。通常對氣泡這種問題,要預先進行處理,如果等到氣泡進入系統想要處理,可就不那么容易了。對流動相進行提前過濾和脫氣處理,這是一個比較好的解決辦法。大家可能會想,我選擇實驗分析的HPLC級溶劑還要過濾嘛?答案是:還是要過濾的!流動相過濾可以選擇溶劑過濾器,過濾掉里面的雜質和避免空氣進入系統里。恒譜生溶劑過濾頭可有效濾除流動相中的固體顆粒雜質,不會產生氣泡,...
無論氣相色譜還是液相色譜,我們最終用來分析實驗結果的都是色譜峰。zui理想的色譜峰長什么樣呢?它長得如下圖所示,符合高斯分布的兩邊對稱的色譜峰是理想的峰形。而做色譜分析實驗就好像買彩piao,不是每次都有理想的實驗結果出現的。更多時候,總是會出現一些“奇奇怪怪”的峰型,比如峰拖尾、峰前延、倒峰、寬峰等。為什么會出現這樣的情況呢?要針對不同的峰型來具體分析。比如峰拖尾,這是比較常見的峰型,可能有以下幾種原因:色譜柱如果受到污染,會導致柱效下降,影響分析效果。如果等到發現柱頭污染...
如果說色譜柱在液相色譜分析中的作用好比人的“大腦”,那么色譜填料就好比我們人的“心臟”。液相分析結果好壞和準確性,與填料有著非常重要的聯系。液相色譜填料的種類有很多,主要分為聚合物填料、硅膠基質填料和其它無機填料。其中,硅膠基質的填料被廣泛應用于各種液相色譜分析中。硅膠填料有什么好處呢?硅膠基質純度高,pH值通常在2-8之間,有些特殊的硅膠鍵合相的ph值可以穩定在pH1.5-10。同時還具有比較高的比表面積,高比表面積具有較強的保留能力、柱容量和分離度;機械強度大,可以保證在...
一種新的研究方法的誕生,大多是為了彌補現有技術的不足。反相液相色譜法能解決多種分析應用問題,但對極性和親水性化合物很少或無法保留保留。如果使用正相液相色譜法,用己脘或環已脘來分析這些物質也存在一些局限性,很多極性和親水化合物往往很難溶解,從而限制了NPLC的應用范圍。在此基礎上,誕生了一種新的解決辦法—親水作用液相色譜(HILIC)。在HILIC色譜柱上,物質的洗脫順序與RPLC恰恰相反,在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質,在通常的實驗條件下,它們在HILIC柱上有較強...